不同炮制方法对玉竹成分的影响

中国医药导报2020年3月第17卷第7期窑药物研究窑不同炮制方法对玉竹成分的影响周小祝1田强2石坤连2刘桂娣2易延逵25105151.南方医科大学南方医院药学部袁广东广州510515曰2.南方医科大学中医药学院袁广东广州[摘要]目的考察不同炮制方法对玉竹成分的影响袁为临床炮制品选用提供依据遥方法以醇浸出物量尧玉竹多糖尧玉竹总皂苷为考察指标袁对经过清蒸尧蜜炙尧酒蒸之后的3个批次玉竹炮制品与净玉竹进行比较分析遥采用浸出物测定法测定醇浸出物量曰采用苯酚-硫酸法测定玉竹多糖含量曰采用香草醛-冰醋酸法测定玉竹总皂苷的含量遥结果2个批次蜜炙品醇溶性浸出物与净玉竹比较升高袁差异均有统计学意义渊均P约0.05冤曰1个批次酒蒸品醇溶性浸出物与净玉竹比较降低袁差异有统计学意义渊P约0.05冤曰3个批次清蒸品多糖含量与净玉竹比较升高袁差异均有高度统计学意义渊均P约0.01冤曰1个批次蜜炙品多糖含量与净玉竹比较升高袁差异有统计学意义渊P约0.05冤曰2个批次酒蒸品多糖含量与净玉竹比较下降袁差异有统计学意义渊P约0.05或P约0.01冤曰3个批次清蒸品总皂苷含量与净玉竹比较升高袁差异均有统计学意义渊均P约0.05冤曰3个批次蜜炙品总皂苷含量与净玉竹比较升高袁差异均有统计学意义渊均P约0.05冤曰1个批次酒蒸品总皂苷含量与净玉竹比较升高袁差异有统计学意义渊P约0.05冤遥结论炮制方法对于玉竹成分的影响是复杂的袁玉竹炮制后清蒸可以增加多糖含量袁加热炮制可以增加总皂苷含量袁注意炮制与其功效尧临床炮制品的选用关联的关系遥[关键词]玉竹曰炮制方法曰醇浸出物量曰多糖曰总皂苷[中图分类号]R283.3[文献标识码]A[文章编号]1673-7210渊2020冤03渊a冤-0019-05EffectofdifferentprocessingmethodsonthecompositionofPolygonatumodoratum(Mill.)DruceZHOUXiaozhu1TIANQiang2SHIKunlian2LIUGuidi2YIYankui21.DepartmentofPharmacy,NanfangHospital,SouthernMedicalUniversity,GuangdongProvince,Guangzhou510515,ChinaChina;2.SchoolofTraditionalChineseMedicine,SouthernMedicalUniversity,GuangdongProvince,Guangzhou[Abstract]ObjectiveToinspecttheeffectofdifferentprocessingmethodsonthecompositionofPolygonatumodoratum(Mill.)Druce,andtoprovideexperimentbasisfortheselectingofclinicalprocessedproducts.MethodsThealcoholPolygonatumodoratums(Mill.)DruceandPolygonatumodoratums(Mill.)Drucewerecomparedandanalyzed.Theex鄄extractamount,polysaccharideofPolygonatumodoratums(Mill.)Druce,totalsaponinsofPolygonatumodoratums(Mill.)Drucewereusedasindex.Aftersteaming,honeybroilingandwinesteaming,threebatchesofprocessedproductsoftractionmethodwasusedtodeterminetheamountofalcoholextract.Phenol-sulfuricacidmethodwasusedtodeter鄄minethecontentofPolygonatumodoratums(Mill.)Druce.Vanillin-glacialaceticacidmethodwasusedtodeterminethecontentoftotalsaponins.ResultsThecontentofalcoholsolubleextractoftwobatchesofhoneyprocessedproducts0.05).ThecontentofalcoholsolubleextractinonebatchofwinesteamingproductswaslowerthanthatinPolygonatumodoratums(Mill.)Druce,thedifferencewasstatisticallysignificant(P约0.05).ThecontentofpolysaccharidesinthreebatchesofsteamedfoodwashigherthanthatinPolygonatumodoratums(Mill.)Druce,andthedifferencewasstatisti鄄callysignificant(allP约0.01).ThecontentofpolysaccharidesinonebatchofprocessedhoneywashigherthanthatinwashigherthanthatofPolygonatumodoratums(Mill.)Druce,andthedifferencewasstatisticallysignificant(allP约510515,Polygonatumodoratums(Mill.)Druce,andthedifferencewasstatisticallysignificant(P约0.05).Thecontentofpolysac鄄charideinthetwobatchesofwinesteamingproductsdecreasedthanthatofPolygonatumodoratums(Mill.)Druce,andthedifferencewasstatisticallysignificant(P约0.05orP约0.01).Thetotalsaponincontentofthreebatchesofsteamed(allP约0.05).Thecontentoftotalsaponinsinthreebatchesofhoneyprocessedproductswashigherthanthatin[基金项目]广东省广州市白云区科技计划项目渊2012-KZ-85冤遥[通讯作者]易延逵渊1975.8-冤袁男袁博士袁副教授曰研究方向院药物新剂型尧新技术遥PolygonatumodoratumsproductswashigherthanthatofPolygonatumodoratums(Mill.)Druce,andthedifferencewasstatisticallysignificant(Mill.)Druce,andthedifferencewasstatisticallysignificant(allP约0.05).Thesteamwashigherthanthatofpurebamboo,andtheCHINAMEDICALHERALDVol.17No.7March2020contentoftotalsaponinsinonebatchofwineand19窑药物研究窑中国医药导报2020年3月第17卷第7期differencewasstatisticallysignificant(P约0.05).ConclusionTheeffectsofprocessingmethodsonthecomponentsofcanincreasethecontentofpolysaccharides,andheatingprocessingcanincreasethecontentoftotalsaponins.[Keywords]Polygonatumodoratums(Mill.)Druce;Processingmethod;Alcoholextractamount;Polysaccharide;TotalPolygonatumodoratums(Mill.)Drucearecomplicated.SteamingafterprocessingofPolygonatumodoratums(Mill.)Drucesaponins渊Mill.冤玉竹系百合科植物玉竹Druce的干燥根茎遥具有养阴润肺Polygonatum袁益胃生津odoratums等功效[1-2]多糖和总皂苷含量最多遥玉竹含有多糖袁尧多糖含量通常为皂苷等化学成分遥相关研究显示袁10%其中玉竹玉竹提取左右袁总皂苷含量为3%左右[3-4]物有保护心脏尧抗衰老等作用遥[4-8]玉竹常用的炮制品有净玉竹遥尧炙玉竹尧蒸玉竹尧酒玉竹等野除去杂质采得袁先用竹刀刮上节皮了[9-11]遥净玉竹的炮制方法尧洗净尧润透尧切厚片袁洗净袁叶尧干燥冶遥雷公炮炙论曳记载遥现行炙玉竹的炮制方袁取原药材袁法袁叶雷公炮炙论曳记载野以蜜水浸一宿袁蒸了袁焙干用遥冶现行袁取炼蜜置锅内袁加适量开水稀释后袁投入玉竹片袁用文火拌炒均匀袁不粘手为度袁取出放凉遥蒸玉竹的炮制方法袁叶太平圣惠方曳记载野刮皮蒸曝干冶遥现行袁取原药材袁除去杂质袁洗净袁置容器内蒸至外黑内呈棕褐色袁切段袁干燥遥酒玉竹的炮制方法袁叶本草备要曳记载野竹刀刮去皮节袁蜜水或酒浸蒸用遥冶现行袁取净玉竹片加黄酒拌匀袁闷润袁置笼屉内蒸透袁取出袁摊晾遥中药的炮制与药物功效和药物成分关系密切袁本研究结合传统炮制工艺和现代炮制工艺袁采用清蒸尧蜜炙尧酒蒸三种炮制方法对玉竹进行炮制袁得到清蒸玉竹尧蜜炙玉竹尧酒蒸玉竹炮制品袁考察不同炮制工艺对玉竹浸出物尧多糖尧皂苷类成分的影响情况遥1仪器与试药1.1仪器设备科技有限公司AgilentUV-8454可见紫外分光光度仪渊渊德国德国Sartoriuseppendorf冤曰eppendorf公司公司冤曰冤曰BS-llOSCentrifuge电子秤渊百分之一电子天平5804R渊袁万分之一离心机安捷伦上海佑科袁公司冤遥1.2试药葡萄糖渊批号院130529袁由广州市齐云生物科技有限公司提供200001袁袁纯度跃98%冤曰其余苯酚由中国食跃99%冤曰尧硫酸品药尧品薯蓣皂苷元石油醚检定尧研三氯甲烷究渊院批号提院111539-尧供甲醇袁纯尧度醋酸尧盐酸尧95%乙醇等均为分析纯袁水为纯净水遥冰1.3药材玉竹3个批次[1606001袁产地陕西袁购自安国市20CHINAMEDICALHERALDVol.17No.7March2020聚药堂药业有限公司渊市聚药堂药业有限公司中国冤药业有限公司曰180602袁曰1606013袁产地湖南]袁经南方医科大学中药鉴定产地湖南袁购自天方健袁购自安国教研室刘传明教授鉴定均为百合科植物玉竹Polygo鄄natumodoratum渊Mill.冤Druce的干燥根茎遥1.4统计学方法采用SPSS19.0软件进行数据分析袁计量资料用均数依标准差渊x依s冤表示遥采用t检验遥以P约0.05为差异有统计学意义遥2方法与结果2.1玉竹的炮制100g袁清蒸玉竹的炮制照蒸制法院分别取3个批次的净玉竹各[12]进行炮制遥100g袁蜜炙玉竹的炮制照蜜炙法院分别取3个批次的净玉竹各[12]进行炮制遥100g袁酒炙玉竹的炮制照酒炙法院分别取3个批次的净玉竹各[12]进行炮制遥2.22.2.1炮制对玉竹成分的影响照炮制对醇溶性浸出物的影响叶中华人民共和国药典曳[1]药典曳冶冤2015版一部玉竹项下浸出物测定法要求渊以下简称野叶中国袁按醇溶性浸出物测定法渊叶中国药典曳[12]通则2201冤项下的冷浸法测定袁用70%乙醇作溶剂2015版四部袁依法测定计算供试品中醇溶性浸出物的含量渊%冤遥重复试验3次遥见表1遥结果醇溶性浸物均符合药典规定遥3批清蒸玉竹醇溶性浸出物与净玉竹比较渊均P跃0.05冤曰2个批次蜜炙玉竹醇溶性浸出物高于净袁差异均无统计学意义玉竹袁差异均有统计学意义渊均P约0.05冤曰1个批次酒蒸玉竹醇溶性浸出物低于净玉竹渊P约0.05冤遥袁差异有统计学意义表13个批次玉竹不同炮制品醇溶性浸出物测定结果渊%袁x依s冤批号净玉竹清蒸玉竹蜜炙玉竹酒蒸玉竹160600118060263.69依0.4164.84依0.2465.48依0.30160601360.58依0.1158.76依0.1460.74依0.40*P约61.62依0.7561.31依0.21*0.0564.89依0.27*55.86依0.1062.31依0.12*注院与净玉竹比较60.14依0.162.2.2照炮制对玉竹多糖的影响叶中国药典曳[1]2015版一部玉竹项下含量测定中国医药导报2020年3月第17卷第7期及文献[13]中玉竹多糖测定方法分别测定各炮制品中玉竹多糖含量2.2.2.159.80mg袁对照品溶液的制备遥精密称定袁加水至100取无水mL袁摇匀即得葡萄糖对渊照品每制成2.2.2.2mL含无水葡萄糖约精密称定供试品溶液的制备0.6袁置圆底烧瓶中袁加水分别取各炮制品粗粉约mg的溶液冤遥100mL袁加热回流12h袁g袁用脱脂棉滤过袁如上重复提取1次袁两次滤液合并袁浓缩至适量袁转移至100mL量瓶中袁加水至刻度袁摇匀袁即得2.2.2.3遥3.0尧4.0尧5.0尧6.0标准曲线制备度袁摇匀遥精密量取上述各溶液mL袁分别置精密量取对照品溶液50mL2.0量瓶中mL袁置具塞试管袁加水至刻1.0尧2.0尧中7.0袁分别加5%苯酚溶液1水浴中mL袁摇匀5min袁袁于取出40益袁以相应试剂为空白水浴中保温mL袁混匀30袁min袁迅速加入硫酸袁照取出叶中国药袁置冰典曳[12]在4882015nm版四部通则的波长处测定吸光度0401紫外袁-以吸光度可见分光光度法A值为纵袁坐标袁葡萄糖浓度C为横坐标袁绘制标准曲线袁回归方程为院Y=11.218X+0.0404袁R2在=0.9981袁2.2.2.40.011试品溶液玉竹各炮制品多糖含量测定96耀0.07176g/L之间线性关系良好结果浓度遥2mL袁加乙醇10mL袁搅拌袁离心精密量取各供袁取沉淀加水溶解袁置50mL量瓶中袁并稀释至刻度袁摇匀袁精密量取2mL袁照野2.2.2.3冶项下的方法袁自野加5%苯酚溶液1mL冶起袁依法测定吸光度袁计算袁重复试验3次袁多糖含量结果见表2遥升高3袁差异均有高度统计学意义个批次清蒸玉竹多糖含量与净玉竹比较渊均P约0.01冤曰1袁明显个批次蜜炙玉竹多糖含量与净玉竹比较袁明显升高袁差异有统计学意义渊P约0.05冤曰2个批次酒蒸玉竹多糖含量与净玉竹比较袁明显下降袁差异有统计学意义渊P约0.05或P约0.01冤遥见表2遥表23个批次玉竹不同炮制品多糖含量测定结果渊%袁x依s冤批号净玉竹清蒸玉竹蜜炙玉竹酒蒸玉竹1606001***1806024.53依0.2416060134.78依0.406.88依0.13**6.28依0.556.90依0.59**3.75依0.018.32依0.01**4.70依0.222.68依0.22注院与净玉竹比较*P约0.05袁**P约0.016.12依0.164.19依0.295.48依0.04*2.2.3参考有关文献总皂苷测定方法炮制对玉竹总皂苷的影响[14-16]中玉竹总皂苷含量进行测定遥袁对各炮制品2.2.3.15.83mg袁对照品溶液的制备用少量甲醇溶解袁然后用甲醇定容到精确称取薯蓣皂50苷元mL袁窑药物研究窑121院样品紫外吸收图谱图1多糖测定紫外吸收图谱曰2院葡萄糖对照品紫外吸收图谱摇匀即得2.2.3.2精密称定供试品溶液的制备渊制成每mL含薯蓣皂苷元约袁罝烧瓶中袁加一定量分别取各炮制品粗粉约0.1mg的溶液80%乙醇袁浸泡30min袁1冤遥g袁按一定条件2溶液次袁渊温度60益尧料液比60尧时间30min冤超声25合并滤液mL使溶解袁回收乙醇至干袁定量转移至烧瓶中袁加入3袁mol/L加热回流盐酸水解151h袁放冷袁用石油醚渊60耀90益冤萃取5干袁mL袁加三氯甲烷适量溶解合并石油醚液袁水洗至中性袁定量转移至袁回收石油醚至次袁每次25mL量瓶中袁三氯甲烷定容至刻度袁摇匀袁得玉竹总皂苷元供试品溶液2.2.3.3遥试品溶液于具塞试管中检测波长的选择袁吸取挥干溶剂2mL袁对照品溶液和供分别加5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL袁高氯酸0.8mL袁摇匀袁密塞袁置70益恒温水浴显色15min袁取出后立即以冰水冷却5min袁加冰醋酸10.0mL袁摇匀袁在400耀600nm波长范围内扫描袁结果在波长为533nm处有最大吸收峰遥见图2遥121院样品紫外吸收图谱图2曰2院玉竹总皂苷扫描图薯蓣皂苷元对照品紫外吸收图谱2.2.3.41尧2尧3尧4尧5尧6标准曲线的制备按野2.2.3.3冶项下方法显色mL于磨口具塞试管中分別准确吸取对照品溶液袁于533nm袁水浴挥发溶剂波长处测定其袁C吸光度为横坐标遥以吸光度袁绘制标准曲线并建立线性回归方程A值为纵坐标袁标准品溶液的浓度袁结CHINAMEDICALHERALDVol.17No.7March202021窑药物研究窑果为2.2.3.5Y1.0加样回收试验=11.65X-0.1054袁取R2=0.9994遥按野2.2.3.2冶g袁精密称定项下方法同时制备供试品溶液袁加入对照品薯蓣皂苷元约1606013批次玉竹蜜炙品约袁5.163依法测定mg袁计算加样回收率袁重复试验6次遥该方法回收率良好袁回收率在90豫耀108豫之间袁平均回收率为98.66%袁RSD2.2.3.6值为同日期取精密度2.09豫遥1606013尧重复性玉竹蜜炙品约尧稳定性试验1.0g袁分别在精密称定6个不袁进行精密度实验曰取1606013玉竹蜜炙品约1.0g袁精密称定1606013袁重复测定度袁进行稳定性试验玉竹分别在6次袁进行重复性试验曰同时取一份遥0尧20尧40尧60尧80按野2.2.3.2冶项下方法制备供试min测定其吸光品溶液袁依法测定袁结果精密度RSD值为1.26%袁重复性RSD值为1.84%袁仪器精密度尧方法重复性良好1.23豫遥曰供试品溶液在80min内稳定性良好袁RSD值为2.2.3.7精密称定总皂苷含量测定袁按按野2.2.3.2冶取各批次玉竹炮制品约项下方法制备供试品溶液1.0g袁袁依法显色测定吸光度袁按标准曲线计算总皂苷含量袁重复试验明显升高3个批次清蒸玉竹总皂苷含量与净玉竹比较3次遥见表3遥袁差异均有统计学意义渊均P约0.05冤曰3袁均个批次蜜炙玉竹总皂苷含量与净玉竹比较袁均明显升高袁差异均有统计学意义渊均P约0.05冤曰1个批次酒蒸玉竹总皂苷含量与净玉竹比较袁均明显升高袁差异有统计学意义渊P约0.05冤遥表33个批次玉竹各炮制品中玉竹总皂苷含量测定结果渊%袁x依s冤批号净玉竹清蒸玉竹蜜炙玉竹酒蒸玉竹16060011806020.3084依0.0516060130.2261依0.030.4217依0.01*0.3647依0.05*0.4222依0.01*0.3808依0.01*0.3353依0.020.3437依0.01*注院与净玉竹比较0.3769依0.01袁*P<0.4430依0.02*0.050.5163依0.03*0.3502依0.033讨论玉竹炮制对醇溶性浸出物量影响结果原因可能是加入适量蜜而导致浸出物量有所升高曰而酒蒸可能是加入酒后蒸制袁包括挥发性成分等成分随酒蒸馏而散失[17]加热对多糖有一定的破坏作用遥玉竹炮制对玉竹多糖影响可能是蜜炙短时间袁导致多糖含量有下降趋势曰酒蒸可能是加入酒后蒸制袁一方面因酒的作用使多糖过分分解袁另一方面可能操作过程中随酒液流失曰而清蒸可能使玉竹苷类成分分解出多糖遥玉竹炮制对玉竹总皂苷影响分析袁使玉竹多糖含量增加[18-19]原因可能清蒸尧蜜炙尧酒蒸等加热炮制方法可以使总皂苷分解或者是从细胞组织间释放出来袁从而使总皂22CHINAMEDICALHERALDVol.17No.7March2020中国医药导报2020年3月第17卷第7期苷含量增加[20]炮制方法对于玉竹成分的影响同时也是复杂的遥袁玉竹糖类成分除了多糖袁同时还有大量的简单糖类成分袁而简单糖类成分跟多糖之间袁可能存在相互转化的情况袁比如蒸制过度可能导致多糖分解袁或者加辅料蒸制袁可能加速多糖分解为简单糖类遥因此炮制方法对于玉竹成分的影响可以进一步进行深入的研究袁可以进一步研究多糖和简单糖类袁多糖和皂苷之间的相互关联问题遥同时可以联系玉竹的功效做进一步的研究袁炮制方法对于玉竹成分的影响跟其功效相关袁涉及到临床炮制品的选用遥玉竹多糖跟玉竹养阴生精的功效相关袁跟抗衰老尧降血糖尧抗氧化尧增强免疫等有关袁而皂苷跟玉竹润肺尧益胃等功效相关遥在玉竹加工炮制和临床使用过程中袁仍需考虑不同炮制方法对药材功效的影响袁做到更加合理地用药[21-22][参考文献]遥[1]国家药典委员会国医药科技出版社援中华人民共和国药典袁2015院85.[S].一部.北京院中[2]张廷模532.援临床中药学[M].北京院人民卫生出版社袁2010袁[3]宁慧院袁2010.援玉竹活性成分与品质分析[D].汉中院陕西理工学[4]李妙然究进展[J].袁秦灵灵袁魏颖袁等援玉竹化学成分与药理作用研[5]杨禹晗损伤大鼠心肌细胞线粒体损伤及凋亡的保护作用袁陈超英中华中医药学刊袁袁占鹏援玉竹提取物对心肌缺血再灌注袁2015袁33渊8冤院1939-1943.[J].中[6]国实验方剂学杂志吴美平袁2018袁24渊16冤院136-140.心力衰竭大鼠血流动力学的影响袁熊旭东袁董耀荣袁等援玉竹乙醇提取物对心梗后[J].中国实验方剂学杂[7]志牟凤辉袁2009袁15渊11冤院67-70.袁周小平袁刘昕袁等援中药玉竹甾体皂苷类成分及[8]罗纯清渊1冤院36-39袁43.其对小鼠脾细胞增殖的影响[J].中国药物评价袁2017袁34药袁2018袁14渊7冤院95-97.袁王兴援玉竹药理作用研究进展[J].亚太传统医[9]陈胜璜响[J].湖南中医药大学学报袁蒋孟良袁周日宝援不同炮制方法对玉竹质量的影[10]王冬梅袁吕振江袁王永红袁等袁2007袁27渊3冤院18-19.炮制工艺[J].浙江农林大学学报援多指标综合评价玉竹酒蒸[11]王冬梅袁吕振江袁王永红袁等援多指标综合评价玉竹蜜蒸袁2013袁30渊1冤院100-106.[12]国家药典委员会炮制工艺研究[J].援中草药中华人民共和国药典袁2012袁43渊10冤院1934-1938.中国医药科技出版社袁2015袁31.[S].四部.北京院[13]彭秧锡糖含量袁[J].彭月明化学分析计量援苯酚-硫酸分光光度法测定玉竹中多[14]吕晓茜袁2006袁26渊5冤院9-31.研究[J].袁中国现代中药包京珊袁张蕾袁袁2012袁14渊5冤院45-47.等援玉竹总皂苷超声波提取工艺渊下转第34页冤窑综述窑中国医药导报2020年3月第17卷第7期ofresveratrolandtriacetylresveratroloncellprolifera鄄tion袁apoptosis袁andSTAT3andNF-资Bsignalinginpan鄄[13]何春游袁张法灿袁郭先文袁等.苦参碱对胰腺癌CFPAC-1细胞增殖尧凋亡及Hedgehog信号通路的影响[J].世界华人消化杂志袁2016袁24渊3冤院338-346.[14]LiW袁MaJ袁MaQ袁etal.Resveratrolinhibitstheepithe鄄CurrMedChem袁2013袁20渊33冤院4185-4194.creaticcancercells[J].SciRep袁2016袁6渊1冤院31672.effectofresveratrolandapocyninonpancreaticcarcino鄄andERK1/2[J].Oncotarget袁2015袁6渊40冤院42963-42975.4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