【摘要】 目的:了解结核抗体(TB-Ab)对肺结核的诊断价值。方法:用TB-DOT金标结核快速诊断试剂盒对304例结核病人、100例肺部其他疾病病人以及100例正常献血员作为对照组进行血清中的TB-Ab的检测,并同时与结核菌直接涂片和结核菌培养进行对照,统计试验资料。结果:304例结核病人血清结核抗体的总阳性率为74.0%,其中结核菌直接涂片和结核菌培养均为阴性125例,TB-Ab阳性75例,阳性率为60.0%;结核菌直接涂片阳性,结核菌培养阳性137例,TB-Ab阳性116例,阳性率为84.6%;结核菌直接涂片阳性,结核菌培养阴性30例,TB-Ab阳性25例,阳性率为83.3%;结核菌直接涂片阴性,结核菌培养阳性12例,TB-Ab阳性9例,阳性率为75.0%。结论:血清结核抗体对结核病诊断和鉴别诊断具有一定的临床价值。
【关键词】血清;结核病;结核抗体
近年来随着流动人口的不断增多和爱滋病在全球大规模流行,在世界范围内结核病卷土重来,已成为人类头等传染病。检验结核抗体是结核病诊断和鉴别诊断的重要辅助方法。为了评估结核抗体快速诊断试剂盒对结核病诊断的价值,我们作了结核抗体试剂与细菌学的符合情况对比。
1.材料与方法
1.1 检测试剂。结核抗体试剂(TB-DOT)为上海奥普公司提供的澳大利亚B&J Life Science Laboratory Company产品,抗原为纯化的结核杆菌特异性外膜抗原,利用斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)的原理。血清结核抗体检测标本量为40 ul。按试剂说明书操作:1.在检测板的反应孔中间加入2滴封闭液,等待薄膜吸入。2.取40 ul新鲜的血清标本加入反应孔中间,等待薄膜吸入。3.在反应孔中间加入6滴洗涤液,等待薄膜吸入。4.在反应孔中间加入2滴金标液,等待薄膜吸入。5. 在反应孔中间加入6滴洗涤液,等待薄膜吸入,目测结果。结核菌直接涂片为痰液直接涂片,自然干燥后“金胺O”染色,用荧光显微镜检查。结核菌培养法用改良罗氏培养基进行37℃培养8周,观察结果或用BECTEC MGIT-960仪器快培6周,观察结果。
1.2 检测对象。结核病组304例,男186例,女118例,年龄15-82岁,均来自本院,是根据X线、B超、病史诊断的肺结核住院患者;肺部其他疾病组100例均来自本院,其中肺部肿瘤71例,其他疾病(包括肺炎、支扩、慢阻肺等)29例;对照组为100例正常献血员。
2.结果
三类疾病组测定结果(见表1)表1 三类疾病组测定结果三种方法测定肺结核组结果分析(见表2)表2 肺结核组TB-Ab与细菌学检查的检测结果血清TB-Ab的方法学指标(见表3)表3 血清TB-Ab的方法学指标
3.讨论
多年来诊断结核病的主要方法仍是痰涂片染色镜检结合X线胸片检查以及细菌培养等。尤其是细菌学的检查一直作为肺结核诊断的金标准,其中涂片法特异性高,但敏感性差,分离培养结核分枝杆菌由于结核菌自身生长的速度缓慢,病人少痰、无痰、留取痰液方法不当等多种原因,使痰结核菌的阳性率很难进一步提高[1],使一部分痰菌阴性的肺结核诊断较为困难。
表1说明:肺结核患者的血清用TB-DOT检测的结核抗体阳性率为74.0%,而在肺部肿瘤组阳性率仅为8.4%,肺部其他疾病组阳性率仅为10.3%0在肺结核组中,血清结核抗体的敏感性为74.0%;在肺部肿瘤组中血清结核抗体的特异性为91.6%,在肺部其他疾病组中血清结核抗体的特异性为89.7%、在对照组中血清结核抗体的特异性为91.0%,这四组结果之间有显著差异性。说明了结核抗体的检测可作为肺结核和其他肺部疾病的重要鉴别指标之一。本文使用的结核抗体试剂盒是以结核分枝杆菌阿拉伯糖甘露糖脂(LAM)为抗原,用葡萄糖A蛋白胶体金缀合物作标记物,检测血清中相应的结核抗体,方法简便、快速,敏感性高,试剂盒中所用抗原的特异性是测试结果好坏的决定性因素[2]。
肺结核的实验室诊断方法众多,各自的敏感性和特异性也相差较大。因此选用合理的检测方法相当重要[3]。本文进行了血清结核抗体、痰液直接涂片找抗酸杆菌和结核菌培养三种方法的比较。表2说明:在179例痰菌阳性患者,三种测定方法均为阳性116例(84.6%),阴性63(35.2%)为一种或两种方法阳性而其他方法阴性;在125例痰菌阴性患者中TB-Ab阳性数为75例(60.0%);在30例涂片(+)培养(-)和12例涂片(-)培养(+)中TB-Ab阳性率分别为83.3%和75.0%;而在137例涂片培养均(+)的患者中TB-Ab阳性数116(84.6%)。上述三种方法单一检测时均存在一定数量的漏检率,而二种方法联合检测时阳性率可达75.0% — 83.3%,三种方法联合检测时阳性率可达84.6%,说明了应用二种或二种以上方法联合检测能显著提高痰菌阴性肺结核的阳性检出率[4]。
涂阴肺结核的诊断是临床上常遇到的问题。当病人肺部出现异常阴影怀疑肺结核,而痰涂片镜检抗酸杆菌阴性时,除多次查痰以及等待痰结核菌培养结果外,为了肺癌及其他肺部疾病的鉴别,有时需进行纤维支气管镜检查及肺活检,以获得病原学及病理学证据。因此,血清学诊断可为涂阴肺结核的诊断提供有益的参考资料[5]。表3说明:血清结核抗体对痰菌阳性肺结核的敏感性为83.8%,特异性为91.0%,阳性预期值为94.3%,阴性预期值为75.8%。血清结核抗体对痰菌阴性肺结核的敏感性为60.0%,特异性为91.0%,阳性预期值为89.3%,阴性预期值为64.5%。本文中125例痰菌阴性的肺结核患者中血清结核抗体阳性的为75例,阳性率可达60%。说明了在这些病人的鉴别诊断中结核抗体起着举足轻重的作用。本法操作简单,结果直观,无论单一或批量样品均可随时检测,其次金标记物较稳定,冻干后可在室温下长期保存,反应快速,诊断率高,特别适合结核分枝杆菌阴性及肺外结核的诊断,是一种辅助临床诊断结核病的实用有效的免疫学方法之一,值得推广应用。但不令人满意的是无论肺部其他疾病组还是肺部肿瘤组,假阳性率分别为10.3%和8.4%,是否与直接检测未被稀释的血清,易于引起非特异性吸附有关,值得进一步研究。
【参考文献】
[1] 高梦秋田苗不同结核分枝杆菌抗原对结核病的诊断价值.中华结核和呼吸杂志,1999,22(10):613-614。
[2] 鲁启超,董云秋,徐茹,等.血清抗结核分支杆菌抗体对结核病的诊断价值.中华结核和呼吸杂志,1998,21:82-84。
[3] 秦光祖阎萍三指标联合检测对痰涂片阴性痰结核诊断价值探讨.中国防痨杂志,1997,(2):94-96。
[4] 靳安佳李来娣胡忠义三指标联合检测对活动性肺结核诊断价值探讨,1999,(2):142。
[5] 熊礼宽林振南黄俊彦三种抗体检测对肺结核诊断价值的探讨[J] .中华结核和呼吸杂志,1997,20(3):186。