【应用指南】微量热泳动仪MST,助力分子间相互作用分析!
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时间：1天前
微量热泳动仪MST在生命科学领域中扮演着重要角色，它通过检测温度梯度中生物分子的电泳迁移率变化，来分析生物分子间的相互作用。MST技术具有无需固定样品、样品用量极小、能在生物溶液中直接检测分子相互作用、方便快捷等优点，是近年来研究生物分子相互作用的强有力工具。该技术已被广泛应用于预防医学、基础医学、临床医学、生物学等生命科学领域。
MST仪器通过红外激光照射样品，形成温度梯度，从而检测荧光变化。此过程利用分子受到的热泳动作用力，从加热区域向低温区域移动，并受到浓度梯度和质量扩散力的作用，最终达到平衡状态。MST技术可应用于任何生物分子间的相互作用分析，包括亲和力、结合能量学、化学计量学参数、酶动力学参数、结合位点、抑制物亲和力等。
荧光标记是MST检测的关键，对于Lable Free的MST机型，可以直接利用蛋白的内源荧光进行检测；对于NT.115等MST机型，则需要对目标分子进行荧光标记。荧光标记可以在前期目标分子的构建中完成，也可以在提纯后进行。标记过程需注意避免占据分子相互作用的活性结合位点。
通过梯度滴定实验，MST技术可以测量计算分子间的结合常数，分析分子间相互作用的动力学。MST技术在实验操作上非常简单，且实时获得数据，稳定性高，运行成本低，无需日常维护。
在应用实例中，MST技术被用于研究朱砂叶螨适应植物硒防御的机制、桔小实蝇气味结合蛋白的注释及功能研究，以及绿盲蝽触角特异气味结合蛋白配体结合特征研究。这些应用展示了MST技术在理解生物分子相互作用和设计剂方面的潜力。
MST技术因其在生命科学领域的广泛适用性和高效性，成为了研究生物分子相互作用的重要工具，为疾病发生机制、药物发现和生物系统理解提供了基础。
