发布网友 发布时间:2024-12-31 10:07
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热心网友 时间:2024-12-31 10:33
细胞凋亡检测实验是研究细胞生命活动的重要环节,通过多种方法来检测细胞的凋亡情况,其中TUNEL染色作为一种结合分子生物学与形态学的研究方法,具有重要价值。TUNEL染色技术主要利用脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)和生物素标记的脱氧核糖核苷酸,将断裂的DNA链末端标记,以此来检测凋亡细胞。实验步骤包括充分脱蜡和水化、把握好细胞通透时间、适当延长TUNEL反应液时间、选择合适的DAB显色条件、充分清洗PBS以及封闭内源性POD。注意事项包括设立阳性与阴性细胞对照、使用特定对照样本、遵守特定实验条件、选择合适的染色方法、合理配置PBS、在蛋白酶K消化后使用封闭液、临用前配制TUNEL反应液以及避免使用颜色变深的20×DAB溶液。服务项目包括对各类组织样品的凋亡检测,实验流程涵盖脱蜡水化、固定、洗涤、通透、预平衡、荧光素-12dUTP标记DNA断链、终止反应、封片镜检等步骤,确保实验结果的准确性和可靠性。