STR鉴定结果怎么看?

发布网友 发布时间:2025-01-08 10:03

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热心网友 时间:2025-01-08 10:29

STR(Short Tandem Repeat,短串联重复序列)是一种基因位点,包含长度3-7个碱基对的短串连重复序列。这些序列在人类基因组中广泛存在,作为高度多态性标记,具有作为细胞DNA指纹的潜力。STR基因座的等位基因通过扩增区域重复序列的拷贝数来区分。PCR(聚合酶链式反应)用于检测这些基因座,通过毛细管电泳分离后使用荧光检测来识别。依据所得的STR分型结果,与专业细胞STR数据库对比,可以推算出样品所属的细胞系或潜在交叉污染的细胞系。

STR分型图谱显示PCR扩增后的片段长度和分型信息。通常情况下,人源或小鼠细胞的STR图谱上,一个基因位点会出现1个或2个峰,表示纯合或杂合状态。然而,出现3个或更多峰称为多等位基因。这种情况下,1-2个多等位基因可能源自细胞变异,不视为污染;≥3个多等位基因则可能提示存在同源物种交叉污染。

以MDA-MB-436和RKO细胞为例,它们的STR位点信息均显示良好,无人源细胞交叉污染。所有位点均为单(纯合)或双峰(杂合)。通过与细胞数据库的比对,可以获取更多相关信息,数据来源包括ATCC、DSMZ、JCRB等细胞库以及文献和资料记载。

STR鉴定结果与匹配度密切相关。匹配度≥80%表示细胞系为标准细胞系或衍生细胞系,55%-80%需要结合细胞系形态、特异性标记物等进行辅助分析和综合判断,≤55%则与标准细胞系无关。

对于无法采用STR鉴定检测的人及部分小鼠以外种属细胞,以及种属间细胞交叉污染问题,可以采用细胞种属鉴定方法。线粒体COI基因具有种属特异性,常用于物种鉴定。通过提取细胞DNA,用种属荧光复合引物MIX扩增动物线粒体COI基因,然后通过琼脂糖凝胶电泳分析,可以快速准确地判断细胞种属及是否存在不同种属交叉污染。不同的物种具有特定的碱基长度,例如智人391bp、中国仓鼠315bp、恒河猴287bp、非洲绿猴222bp、大鼠196bp、犬172bp、小鼠150bp、牛102bp等。

热心网友 时间:2025-01-08 10:35

STR(Short Tandem Repeat,短串联重复序列)是一种基因位点,包含长度3-7个碱基对的短串连重复序列。这些序列在人类基因组中广泛存在,作为高度多态性标记,具有作为细胞DNA指纹的潜力。STR基因座的等位基因通过扩增区域重复序列的拷贝数来区分。PCR(聚合酶链式反应)用于检测这些基因座,通过毛细管电泳分离后使用荧光检测来识别。依据所得的STR分型结果,与专业细胞STR数据库对比,可以推算出样品所属的细胞系或潜在交叉污染的细胞系。

STR分型图谱显示PCR扩增后的片段长度和分型信息。通常情况下,人源或小鼠细胞的STR图谱上,一个基因位点会出现1个或2个峰,表示纯合或杂合状态。然而,出现3个或更多峰称为多等位基因。这种情况下,1-2个多等位基因可能源自细胞变异,不视为污染;≥3个多等位基因则可能提示存在同源物种交叉污染。

以MDA-MB-436和RKO细胞为例,它们的STR位点信息均显示良好,无人源细胞交叉污染。所有位点均为单(纯合)或双峰(杂合)。通过与细胞数据库的比对,可以获取更多相关信息,数据来源包括ATCC、DSMZ、JCRB等细胞库以及文献和资料记载。

STR鉴定结果与匹配度密切相关。匹配度≥80%表示细胞系为标准细胞系或衍生细胞系,55%-80%需要结合细胞系形态、特异性标记物等进行辅助分析和综合判断,≤55%则与标准细胞系无关。

对于无法采用STR鉴定检测的人及部分小鼠以外种属细胞,以及种属间细胞交叉污染问题,可以采用细胞种属鉴定方法。线粒体COI基因具有种属特异性,常用于物种鉴定。通过提取细胞DNA,用种属荧光复合引物MIX扩增动物线粒体COI基因,然后通过琼脂糖凝胶电泳分析,可以快速准确地判断细胞种属及是否存在不同种属交叉污染。不同的物种具有特定的碱基长度,例如智人391bp、中国仓鼠315bp、恒河猴287bp、非洲绿猴222bp、大鼠196bp、犬172bp、小鼠150bp、牛102bp等。

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